ADVANCED ANA - immunblot
Kutatás
A szisztémás autoimmun reumatikus betegségeket az intracelluláris fehérjék és a nukleinsavak megemelkedett szintű autoantitestek jelenléte jellemzi. Ezeket az autoantitesteket általában antinukleáris antitesteknek (ANA) nevezik, mivel elsősorban nukleáris antigéneket céloznak meg, de tartalmaznak a sejtek citoplazma elleni antitesteket is.
Az ANA kimutatása a vérben nagy érzékenységgel rendelkezik, ezért ez a szisztémás kötőszöveti betegségek legjobb szűrővizsgálata. Az ANA prevalenciája ezeknél a betegeknél 20 és 100% között van. A reumás megbetegedések azonosításához nagyon fontos megkülönböztetni az ANA csoport különböző antitestjeit. Az antinukleáris antitestek két fő kategóriáját írják le jelenleg:
- DNS-t és hisztonokat célzó autoantitestek;
- Oldható nukleáris antigéneket megcélzó autoantitestek (kivonható nukleáris antigének - ENA).
Az antinukleáris antitestek célantigénjeinek sokfélesége rendkívül nagy. Ezért az általános antinukleáris antitestek vizsgálatának pozitív eredménye jelenlétében meg kell vizsgálni azokat a specifikus antitesteket, amelyek a diagnózist egy adott autoimmun betegségre irányítják. Az ANA immunblot használatának az az előnye, hogy kiterjesztett autoantitest profilokat vizsgál. Ez lehetővé teszi 16 különböző antitest megkülönböztetését az ANA-csoporttól.
Antinukleáris antitestek típusai
Anti-U1nRNP antitestek kis ribonukleoprotein (snRNP) antigének ellen irányulnak. Jellemzőek a Sharpe-kórra (vegyes kötőszöveti betegség);
Anti-Sm antitestek az első páciensről (Stephanie Smith) elnevezett Sm antigénre irányulnak. Az Sm antigén az snRNP csoport része. A betegségre jellemző a szisztémás lupus erythematosus;
Anti-SS-A (Ro) antitestek antigén ellen irányulnak, amely szintén része az snRNP-ben oldódó A anyagnak vagy a Robert antigéncsoportnak. Jellemzőek a Sjögren-szindróma és a lupus betegségre. Átjutnak a placenta gáton és bejutnak a magzati vérbe, és veleszületett szisztémás lupus erythematosust, valamint veleszületett AV blokkot okozhatnak a magzatban. Ez szükségessé teszi a terhes nők vizsgálatát;
Anti-SS-B (La) antitestek olyan fehérje ellen irányulnak, amely szerepet játszik az RNS polimeráz III - oldható B anyag vagy a Lane antigén transzkripciójában. Jellemzőek a Sjogren-kór szindrómájára;
Anti-Ro52 antitestek az 52 kDa antigén ellen irányulnak, és mind reumatikus, mind nem reumatikus betegségekhez kapcsolódó nem specifikus autoantitestként írják le. Jellemzőek a Sjögren-szindrómára;
Anti-Scl-70 antitestek nem hiszton 70 kDa fehérje ellen irányulnak. Megállapították, hogy ez a fehérje a nukleoplazmában és a nukleolokban elhelyezkedő I. osztályú topoizomeráz I enzimek által történő lebontás terméke, amelynek feladata a DNS információintegritásának fenntartása. A betegséget a progresszív szisztémás szklerózis (Scleroderma) jellemzi;
Anti-PM-Scl antitestek a PM-Scl nukleáris komplex fehérjéi ellen irányulnak. A fő antigének 2 polipeptid, PM-Scl 75 és PM-Scl 100 néven ismertek. A két antigén független egymástól, és nem lép kölcsönhatásba. Ez a fehérje komplex részt vesz a riboszóma bioszintézisében. Ezek az antitestek a szkleroderma átfedés szindrómájához kapcsolódnak a polimiozitissel/dermatomiozítissal
Jo-1 antitestek hisztidil-t-RNS szintetáz enzim ellen irányulnak. A Jo-1 elleni antitestek a dermatomyositis/polymyositis betegség szerológiai markerei, prevalenciájuk a betegek között 20-40% között van. Ezen autoantitestek jelenléte a betegség súlyosabb formájához és gyakoribb visszaesésekhez kapcsolódik. Az autoantitestek korán, néha a tünetek kezdete előtt kimutathatók;
Anti-CENP Antitestekben olyan fehérje ellen irányulnak, amely az osztóorsó kapcsolódási tartományában helyezkedik el a sejtosztódás során. Az összes anticentromer antitestet tartalmazó vérszérumot CENP-B-vel reagáltattuk. A CENP B elleni antitestek a CREST szindróma (Calcinosis, Raynaud's, Esophagitis, Telangiectasia) szerológiai markerei, amelyek a progresszív szisztémás szklerózis (Scleroderma) egyik altípusa. 70-90% -os specifitással rendelkeznek. Elsődleges biliaris cirrhosisban szenvedő betegeknél is előfordulhatnak;
PCNA antitestek (szaporodó sejt antigén) olyan fehérje ellen irányulnak, amely része a DNS-polimeráz enzimnek, és így részt vesz a DNS-duplikáció és helyreállítás folyamatában. Ezt az antigént ciklin I-nek is nevezik, amely szintén szerepet játszik a sejtciklus szabályozásában. A közvetett immunfluoreszcenciában történő kimutatása változó (szemcsés/festett), a sejtmagok fele alacsony telítettségű. Az anti-PCNA-t a szisztémás lupus erythematosusban szenvedő betegek 3% -ában észlelik;
Antitestek kettős szálú DNS ellen reagálnak a kettős szálú dezoxiribonukleinsav (DNS) fő komponenseivel. Ezek az antitestek a szisztémás lupus erythematosusra magas specificitású marker, a betegek körülbelül 60% -ában (30-90% -ában) vannak jelen. Ez a betegség klinikai aktivitásának nyomon követésére szolgáló marker is. Kis százalékban társulhatnak a gyógyszer által kiváltott lupusszal, a reumás ízületi gyulladással és a szklerodermával is;