Spektrofotometriai vizsgálat Patológia
A kémia területén a spektrofotometria az anyag reflektivitásának vagy transzmissziós tulajdonságainak mennyiségi mérése a hullámhossz függvényében. A spektrofotometriában spektrofotométerként ismert fotométereket használnak, amelyek a fénysugár intenzitását mérik a szín (hullámhossz) függvényében. A spektrofotométerek fontos jellemzői a spektrális sávszélesség (a vizsgálati mintával átvihető színtartomány), a minta-átviteli százalék, a minta abszorpciójának logaritmikus tartománya és néha a reflexió mérésének százalékos aránya.
Spektrofotométert használnak tipikusan az oldatok, átlátszó vagy átlátszatlan szilárd anyagok, például csiszolt üveg vagy gázok permeabilitásának vagy visszaverődésének mérésére. Bár sok biokémiai anyag színes, elnyeli a látható fényt, és ezért kolorimetriás eljárásokkal mérhető, de még a színtelen biokémiai anyagok is gyakran színvegyületekké alakíthatók, amelyek alkalmasak kromogén színképző reakciókra, hogy kolorimetriás elemzésre alkalmas vegyületeket nyerjenek. Megtervezhetők azonban a felsorolt fénytartományok diffúziójának mérésére, amelyek jellemzően körülbelül 200-2500 nanométert fednek le, különféle kontrollok és kalibrációk segítségével. Ezen fénytartományokon belül gépi kalibrációra van szükség a fotometriai meghatározás hullámhosszától függően változó szabványok alkalmazásával.
A ... haszna spektrofotometriás vizsgálat különféle tudományos területekre terjed ki, mint például a fizika, az anyagtudomány, a kémia, a biokémia és a molekuláris biológia. Széles körben használják számos iparágban, beleértve a félvezetőket, a lézer- és optikai gyártást, a nyomtatást és az igazságügyi vizsgálatokat, valamint a kémiai kutató laboratóriumokban. A spektrofotometriát gyakran használják az enzimaktivitás mérésében, a fehérjekoncentrációk meghatározásában, az enzim kinetikus állandók meghatározásában és a ligandumkötési reakciók mérésében. Végül a spektrofotométer az ellenőrzéstől vagy a kalibrálástól függően meghatározhatja, hogy a megfigyelt hullámhosszak kiszámításával milyen anyagok vannak jelen a célpontban, és pontosan mennyit.
A spektrofotometriás vizsgálatnak az orvostudomány szinte minden ágában nagy klinikai jelentősége van. Képessége mérni az anyagcsere szempontjából fontos anyagok testfolyadékokban, például vérben, cerebrospinális folyadékban, vizeletben és magzatvízben lévő koncentrációját, döntő fontosságú a megfelelő diagnosztikai eredmények és a betegek folyamatos nyomon követése szempontjából. Emellett egyes lényeges anyagok korán felismert kisebb hiányosságai megelőzhetik a kapcsolódó egészségügyi problémákat.
Az intenzív terápiában a spektrofotometriás elemzések alkalmazása gyakoribb, mivel az instabil körülmények között szenvedő betegek hajlamosabbak a különböző anyagok, például a vérük mennyiségének drasztikus változásaira. Ily módon az intenzív osztályokon gyakran vannak spektrofotométerek a helyszínen, míg a háziorvosok laboratóriumba küldhetik szondáikat elemzés céljából.
Számos olyan anyag van, amelyet spektrofotométerekkel lehet számszerűsíteni. Ide tartoznak: hemoglobin, eritrociták, hematokrit, amiláz, bilirubin, koleszterin, glükóz, karbamid, kreatinin, lipáz, triglicerid, albumin, alkohol, ammónia, réz, magnézium, laktát, kalcium, vas, szén-monoxid, magnézium-magnézium, magnézium-magnézium és sőt néhány enzim.
A spektrofotométereknek két fő osztálya van:
- egyetlen sugárral
- kettős gerendával
A kettős spektrofotométer összehasonlítja a fényintenzitást két fényút között, az egyik tartalmaz egy referencia mintát, a másik pedig egy vizsgálati mintát. Az egysugaras spektrofotométer a sugár relatív fényintenzitását méri a vizsgálati minta elhelyezése előtt és után. Noha a kettős fénymérő eszközök összehasonlító mérései könnyebbek és stabilabbak, az egyetlen fénysugár dinamikus tartománya nagyobb, optikailag egyszerűbb és kompaktabb. Ezenkívül néhány speciális műszer, például a mikroszkópokra vagy teleszkópokra szerelt spektrofotométerek, a praktikusság érdekében egysugaras eszközök.