Kutatási módszerek

Olvass tovább

Kutatási módszerek

Az emlőrákban a HER2 státusz meghatározásának két ajánlott standard módszere:

  • immunhisztokémiai módszer (IHC)
  • in situ hibridizációs módszer (ISH)

Az immunhisztokémiai meghatározás egy olyan kvantitatív módszer, amely meghatározza a sejtmembránon található HER2 receptorok relatív számát. Minél több ezek a receptorok, annál intenzívebb a minta festése.
A meghatározás a HER2 receptorok (azaz az antigén) antitesthez való kötődésén és a komplexek ezt követő festésén alapul. A festés intenzitását összehasonlítjuk a standardokkal, és így meghatározzuk annak mértékét.

Az IHC módszer könnyebben megvalósítható és alacsonyabb pénzügyi értéke van, mint az in situ hibridizáció. Az eredmények szinte teljes átfedést mutatnak a két módszer között [1]. Ezért az IHC-t "első vonalbeli" módszerként hozták létre a mellrák HER2-állapotának tesztelésére.

Az alábbi ábra bemutatja, hogyan jelentik a HER2 fehérje expresszióját IHC-vel és hogyan értelmezik a lehetséges eredményeket:

átlagos példányszámmal

* Ha nincs ok az anyag nem megfelelőségének gyanújára, és nem észlelhető eltérés a carcinoma szövettani típusa és a teszt eredménye között.

  • 2+ membránfestés mellrák esetén

  • 3+ membránfestés mellrák esetén


Az in situ hibridizáció az ASCO/CAP által javasolt második standard módszer az emlőrák HER2-állapotának meghatározására. Az ISH méri a amplifikációt HER2 a gén, amely szinte mindig a HER2 receptor túlexpressziójának oka.

Az ISH drágább és nehezebben megvalósítható módszer, mint az IHC. Ezért ajánlott reflex vizsgálatként használni, ha a HER2 státust nem lehet egyértelműen meghatározni immunhisztokémiai módszerrel (azaz IHC 2+ értéknél).

Számos különböző ISH technikát fejlesztettek ki:

  • FISH - fluoreszcens in situ hibridizáció
  • CISH - kromogén in situ hibridizáció

  • SISH - ezüst in situ hibridizáció (ISH ezüsttel erősítve)

  • A mérés elvégezhető egy vagy két szondával (Dual ISH). A FISH kivételével minden technika világos mezőt használ.


Az alábbi táblázat az ASCO/CAP ajánlásait tartalmazza, hogyan lehet elszámolni a HER2 gén ISH-val történő amplifikációját egy vagy két próbával, és hogyan lehet értelmezni a lehetséges eredményeket [1].