A vércukorszint meghatározása

Módszerek a vérben és más biológiai folyadékokban lévő szénhidrátok meghatározására.

1. enzimatikus módszerek
2. kromatográfiás
3. kolorimetrikus

A szénhidrátok redukáló tulajdonságain alapuló módszerek. A módszereket két nagy csoportra osztják: enzimatikus és klorimetriás módszerekre.

Enzim módszerek: Mennyiségi meghatározás.

Glükóz-oxidáz módszer: A glükózt a levegő oxigénje oxidálja glükóz-oxidáz jelenlétében. A reakció eredményeként glükonsav és hidrogén-peroxid képződik. A reakció második szakaszában a peroxidáz vesz részt, amely katalizálja a hidrogénion átadását a hidrogén-peroxidba, ezáltal a kromogén színtelen formája színes vegyületté alakul.

glükóz + H2O + O2 –––––– → glükonsav + H2O2

H2O2 + kromogén-H2 ––––––- → 2H2O + kromogén

A leggyakrabban használt kromogén az o-ortodianizidin, a fenol-4-amino-fenazon vagy a PAP. A kapott szín intenzitása arányos a glükózkoncentrációval. A szín spektrofotometriás, leggyakrabban 546 nm hullámhosszal.

Hexokináz-glükóz-6-foszfát-dehidrogenáz-módszer:

Ez a módszer kétlépcsős optikai teszten alapul. Ez a legspecifikusabb és legérzékenyebb módszer.

A vércukorszintet befolyásoló tényezők:

1) kutatási anyag

- a vénás vérben a glükóz koncentrációja körülbelül 0,1 - 0,3 mmol/l alacsonyabb, mint a kapillárisban

- plazma és szérum, a koncentráció magasabb, mint az eritrocitáké, 0,55 - 1,11 mmol/l

- az elvitt anyag 3 óránál hosszabb ideig történő szobahőmérsékleten való tartózkodása a koncentráció csökkenéséhez vezet, a glikolízis során a glükóz 10-15% -kal csökken

- a vizsgálati anyag felvételének ideje - a glükóz koncentrációja nappali és éjszakai ingadozásokat mutat, ami reggel, éhgyomorra, teljes mentális és fizikai békében, 8-10 órával az utolsó étkezés után vizsgálatot igényel.

2) Az egészséges emberek szénhidráttartalmú ételekben gazdag étrendje csökkenti a vércukorszintet

---